Análisis morfológico y molecular de Alaria sp. (Trematoda, Diplostomidae) de carnívoros silvestres de Uruguay

Abstract

Alaria es un género de trematodos de la subclase Digenea cuyas formas adultas parasitan el intestino delgado de diversas especies de carnívoros. Se caracteriza por poseer un ciclo de vida heteroxeno en donde requiere de un primer hospedador que es un molusco dulceacuícola y un segundo que en general es un anfibio, desde donde las formas infectantes (mesocercarias) alcanzan a su hospedador definitivo. El ciclo también puede tener hospedadores paraténicos como anfibios, reptiles o mamíferos. En el hospedador definitivo las mesocercarias se desarrollan a metacercarias y posteriormente a adultos. Es considerada una zoonosis, con casos humanos documentados. Para Sudamérica y en particular nuestra región, se ha determinado mediante morfología que la especie presente es Alaria alata, habiendo escasa evidencia molecular que lo apoye. Con el objetivo de caracterizar mediante morfología y análisis moleculares basados en identidad de secuencias y estudios filogenéticos, se realizaron 22 necropsias parasitarias de mamíferos silvestres del Orden Carnívora encontrados muertos en diferentes rutas del país. El 77,3 % (17/22) de los animales: Cerdocyon thous (7/7), Lycalopex gymnocercus (7/7), Procyon cancrivorus (2/6), Leopardus geoffroyi (1/1) y Galictis cuja (0/1), estaban parasitados con helmintos compatibles morfológicamente con el género Alaria y similares a A. alata. A un ejemplar representativo de Alaria de cada hospedador se le realizó extracción de ADN y se amplificaron dos fragmentos de ADN, uno para el marcador mitocondrial citocromo c oxidasa I (COI) y otro nuclear para la región del espaciador transcrito interno (ITS2). Los análisis morfológicos de los ejemplares examinados (n°=73) demostraron que, si bien se hallaron diferencias morfométricas entre los helmintos obtenidos de diferentes hospedadores, no fue posible diferenciarlos entre ellos, así como tampoco de A. alata. En cambio, la identidad de las secuencias obtenidas fue de entre 98,27 % y 100 % con Alaria sp. obtenidas de carnívoros en Argentina para COI y de 99,13 % con Alaria sp. obtenida en anuros en EE. UU. para ITS2, siendo muy diferentes a las secuencias halladas para A. alata de Europa, que fueron entre 90,97 % y 92 % de identidad para COI y 98,52 % para ITS2. Los análisis filogenéticos basados en secuencias COI demuestran que los ejemplares de Uruguay forman un clado de alto soporte con secuencias obtenidas de diferentes muestras de carnívoros de Argentina y se separan del resto de las especies de Alaria. Si bien el número de secuencias disponibles para ITS2 es menor, también se observa que las secuencias de Uruguay no se relacionan A. alata. En base a la evidencia obtenida en este estudio, se puede aseverar que los ejemplares pertenecientes al género Alaria hallados en carnívoros silvestres de diferentes departamentos del país pertenecen a un mismo taxón y que difieren genéticamente de A. alata. Incluso se puede inferir que A. alata no estaría representada en el país y probablemente la región, y que se trate de un caso de especies crípticas.