Arquitectura celular y nuclear diferencial y respuestas microambientales de células pretumorales y tumorales en respuesta a la hipoxia y otras fuentes de estrés.

Abstract

El microambiente tumoral es un entorno alterado que impone múltiples presiones selectivas que conducen a la supervivencia y diseminación de subpoblaciones de células tumorales agresivas que posteriormente puede sobrevivir a otras fuentes de estrés, como la quimioterapia y la radioterapia. En este trabajo, sometimos células pretumorales y tumorales a hipoxia inducida por cubreobjetos, que recapitula la hipoxia intracelular característica del microambiente tumoral temprano, y utilizamos una combinación de microscopía de fase cuantitativa y epifluorescencia para analizar diversas respuestas celulares a este entorno alterado. En normoxia, las células tumorales mostraron diferencias en la organización nuclear, evidenciadas por la disminución del número de focos HP1, y en hipoxia se observaron cambios importantes en la arquitectura nuclear, con un aumento significativo en el número de focos de alta densidad de masa seca en el núcleo de las células tumorales, en comparación con las células pretumorales y no tumorales. Por el contrario, en comparación con las células pretumorales y normales, los niveles de ATP mitocondrial disminuyeron notablemente en las células tumorales en hipoxia, mientras que la activación de las caspasas ejecutoras solo aumentó en las células tumorales en esta condición. Por lo tanto, en términos de organización celular, cambios metabólicos y activación de los procesos de muerte celular, las células tumorales mostraron respuestas más drásticas a un microambiente alterado que sus contrapartes pretumorales y normales. También hemos comenzado a estudiar las respuestas de las células tumorales y pretumorales al cisplatino y la radiación UV, demostrando que ambos tratamientos causan alteraciones marcadas en la arquitectura nuclear, que actualmente buscamos caracterizar con mayor profundidad.