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https://hdl.handle.net/20.500.12008/52828
Cómo citar
| Título: | Efecto de la activación de un canal catiónico inmunoregulador por un nitroalqueno derivado del salicilato en la sobrevida de trasplantes |
| Autor: | Galliussi, Germán |
| Tutor: | Segovia, Mercedes |
| Tipo: | Tesis de doctorado |
| Descriptores: | TRASPLANTES, INMUNOSUPRESORES, SUPERVIVENCIA DEL INJERTO, PROCEDIMIENTOS QUIRÚRGICOS OPERATIVOS |
| Fecha de publicación: | 2025 |
| Contenido: | Resumen de la tesis 5 -- Introducción 7 -- Trasplantes: Características generales 8 -- Bases y mecanismos inmunológicos de la respuesta inmune frente al alotrasplante 10 -- Reconocimiento de aloantígenos 10 -- Modelo de alotrasplante de piel murino en contexto de antígenos menores 12 -- Activación de linfocitos T en la alorespuesta 14 -- Regulación y mecanismos de tolerancia en el contexto del alotrasplante 15 -- Terapias de uso clínico para disminuir el rechazo de los trasplantes 20 -- Clasificación y mecanismos de acción de las drogas inmunosupresoras 21 -- Anticuerpos depletantes 22 -- TMEM176B como regulador de la respuesta inmune 27 -- Compuestos con el grupo funcional nitroalqueno como potentes fármacos antiinflamatorios no convencionales 31 -- Desarrollo de nitroalquenos de segunda y tercera generación 34 -- Hemoxigenasa-1 cumple funciones inmunomoduladoras en trasplantes 43 -- Hipótesis 52 -- Objetivos 54 -- Objetivo general 55 -- Objetivos específicos 55 -- Materiales y métodos 56 -- Animales 57 -- Cultivo de células dendríticas derivadas de médula ósea 57 -- Modelos animales de trasplante y tratamientos 58 -- Western blot 58 -- Expresión génica de HO-1 por qPCR 59 -- Análisis proteómico por espectrometría de masa 60 -- Marcación y análisis por citometría de flujo 61 -- Reacción linfocitaria mixta (MLR) 62 -- Ensayo de proliferación de linfocitos t apc-free 62 -- ensayo de maduración de bmdc 62 -- ensayos de activación e inhibición de akt y mapks 63 -- actividad tmem176b in vitro 63 -- análisis estadísticos 64 -- Resultados 65 -- SANA prolonga la sobrevida de alotrasplantes 66 -- La actividad iónica de TMEM176B es activada por SANA 68 -- El efecto de SANA observado en trasplantes es dependiente de Tmem176b 70 -- La sobrevida del aloinjerto de piel en contexto de antígenos menores no es prolongada por inhibir la actividad del inflamasoma NLRP3 71 -- SANA induce in vitro la expresión de HO-1 en macrófagos y células dendríticas 72 -- SANA induce la expresión de HO-1 in vitro e in vivo en células dendríticas de manera parcialmente dependiente de Tmem176b. 74 -- La regulación de la expresión de HO-1 a través de TMEM176B activado por SANA tiene como intermediario un mecanismo dependiente de Akt. 76 -- SANA modula la maduración de células dendríticas 78 -- SANA inhibe la proliferación de linfocitos T in vitro 81 -- El efecto inhibitorio de proliferación de linfocitos T es dependiente de HO-1 en el MLR 83 -- SANA prolonga la sobrevida y promueve a los linfocitos Tregs en el injerto de manera dependiente de HO-1 84 -- La combinación de SANA con un inmunosupresor específico mejora los efectos en la aceptación de trasplantes 88 -- Discusión 92 -- Conclusiones 104 -- Perspectivas 106 – Agradecimientos 109 -- Referencias bibliograficas 112 -- Anexo 142 -- Anexo 1: Artículo publicado relacionado a esta tesis 143 -- Anexo 2: Tablas de listas de proteínas del análisis proteómico de macrófagos THP-1 tratados con SANA (Figura 2.7A) 155 |
| Resumen: | Los trasplantes de órganos y tejidos representan la solución definitiva cuando se produce un fallo funcional. Sin embargo, la baja disponibilidad de donantes, el rechazo crónico y los efectos secundarios relacionados con las altas dosis de inmunosupresores son un problema no resuelto en medicina, siendo un principal desafío el desarrollo de estrategias terapéuticas que prevengan el rechazo crónico y promuevan tolerancia a largo plazo. Los nitroalquenos, son compuestos con importantes propiedades antiinflamatorias, entre las cuales se ha descrito que inducen a Hemoxigenasa-1, además de que también activan canales iónicos. Como parte de estas moléculas, se ha sintetizado en nuestro laboratorio al ácido 5-(2-nitroetenil) salicílico (SANA), un nitroalqueno derivado del salicilato, el cual completó con éxito un ensayo clínico de Fase-I a/b para enfermedades relacionadas al metabolismo y la obesidad. Se ha estudiado por un lado que la inducción de Hemoxigenasa-1 promueve efectos inmunomoduladores en trasplantes, y por otro, estudios realizados en nuestro laboratorio han demostrado que el canal catiónico TMEM176B aparece como un actor inmunoregulador en el contexto del alotrasplante. Este canal también ejerce un papel inmunoregulador en otros contextos patológicos, como por ejemplo su inhibición farmacológica o deleción genética promueve una respuesta inmunitaria antitumoral. Con estos antecedentes, el objetivo de esta tesis fue el estudio del SANA como modulador de la alorespuesta y sus mecanismos de acción. Se realizaron experimentos en modelos animales de trasplante, donde el principal modelo que utilizamos consistió en un alotrasplante de piel en contexto de antígenos menores (se injerta piel de macho a hembra) donde los ratones WT o Tmem176b-/- fueron tratados diariamente con SANA desde el día -1 antes del trasplante hasta el día 15 después de la cirugía. Se analizó la sobrevida del injerto y el infiltrado de células del sistema inmunológico en el injerto de piel y los ganglios linfáticos drenantes. Los resultados confirmaron que el SANA prolonga la sobrevida de alotrasplantes y es un activador del canal iónico TMEM176B. Además, muestran que SANA prolonga la sobrevida del aloinjerto de manera dependiente de TMEM176B, mostrando un mecanismo donde la activación de TMEM176B por SANA aumenta la expresión de Hemoxigenasa-1 (HO-1) en células dendríticas tanto in vitro como in vivo, siendo dependiente de la fosforilación de AKT. En injertos de piel de ratones tratados con SANA, se ha observado un incremento de células T reguladoras (Tregs) CD4+ FoxP3+ dependiente de HO-1, además que la combinación de SANA con el anti-CD3 (Fab) (anticuerpo inmunosupresor) potencia el efecto in vivo a nivel de la sobrevida e incremento de Tregs en el aloinjerto. En suma, la activación farmacológica de TMEM176B con SANA promueve la inducción de HO-1 que modula la alorespuesta y prolonga la sobrevida del injerto. |
| Editorial: | Udelar. FM |
| Citación: | Galliussi G. Efecto de la activación de un canal catiónico inmunoregulador por un nitroalqueno derivado del salicilato en la sobrevida de trasplantes [en línea] Tesis de doctorado. Montevideo: Udelar.FM. 2025. 164 p. |
| Título Obtenido: | Doctor en Ciencias Médicas |
| Facultad o Servicio que otorga el Título: | Universidad de la República. Facultad de Medicina. |
| Licencia: | Licencia Creative Commons Atribución - No Comercial - Sin Derivadas (CC - By-NC-ND 4.0) |
| Aparece en las colecciones: | Tesis de Posgrado - PROINBIO |
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| G. Galliussi. Acta de Doctorado.pdf | 850,72 kB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |
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