Estudio de fenoles con actividad antioxidante y antiinflamatoria y su vinculación con el factor de transcripción NFkB

Abstract

La presente investigación aborda el estudio de polifenoles extraídos de orujos de uva y su potencial actividad antioxidante y antiinflamatoria, evaluada mediante metodología in vitro e in silico, con énfasis en su interacción con el factor de transcripción NFkB. Este factor es un regulador clave de la respuesta inflamatoria, el crecimiento celular y la apoptosis, y su activación crónica está vinculada con diversas patologías, incluyendo cáncer, enfermedades cardiovasculares y autoinmunes. Los orujos de uva, subproductos de la industria vitivinícola, constituyen una fuente rica en compuestos fenólicos que poseen reconocida capacidad de neutralizar radicales libres (ROS) y de modular vías de señalización celular, lo que los convierte en candidatos con gran valor nutracéutico. La hipótesis de este trabajo propone que los polifenoles presentes en orujos de uva actúan como atrapadores de ROS e interfieren en la función nuclear de NFkB, contribuyendo a efectos antioxidantes y antiinflamatorios. Para ello, se establecieron como objetivos: (i) obtener y caracterizar un extracto polifenólico de orujos de uva; (ii) determinar su contenido fenólico y capacidad antioxidante mediante diferentes ensayos químicos; (iii) evaluar su actividad antiinflamatoria frente al NFkB; y (iv) estudiar mediante métodos in silico posibles mecanismos de interacción entre polifenoles y el complejo NFkB-ADN. La metodología incluyó el desarrollo de una técnica extractiva óptima y posterior extracción y caracterización de compuestos fenólicos de orujos de Tannat y Cabernet Franc, aplicando técnicas como Folin-Ciocalteu, DPPH, ABTS, ORAC, FRAP y ESR. El análisis por HPLC-MS/MS permitió identificar 43 polifenoles. Paralelamente, se realizaron estudios computacionales mediante docking y dinámica molecular, utilizando AutoDock 4.2.6 y MOE2022.02, empleando como base de datos los polifenoles previamente identificados en orujos uruguayos. Se utilizaron células reporteras HT-29-NFkB-GFP para evaluar la actividad antiinflamatoria. Por citometría de flujo se midió la fluorescencia GFP como indicador de activación de NFkB tras estimulación con TNFα. Los ensayos ELISA de IL-8 validaron el mecanismo de acción. Los resultados demostraron que los extractos poseen una elevada capacidad antioxidante y que, compuestos como quercetina, procianidina B4 y malvidina-3-O-glucósido, presentan interacciones favorables con los sitios de unión NFkB-ADN, estabilizando el complejo y reduciendo su capacidad de activación transcripcional. En conclusión, este enfoque integrado (in vitro/in silico) demostró exitosamente el potencial de los polifenoles de orujos como agentes antiinflamatorios naturales mediante modulación de la vía NFkB.