Proteínas de shock térmico y factores reguladores de shock térmico en el endometrio de yeguas : inmunoexpresión endometrial de la proteína de shock térmico HSP90 y su factor de transcripción HSF-1 en la endometritis post inseminación en yeguas

Abstract

La endometritis persistente post-servicio es una de las principales causas de muerte embrionaria temprana en la yegua. Estudios previos han determinado que las proteínas de shock térmico como la proteína de shock térmico 90 (HSP90) y el factor de shock térmico 1 (HSF-1) están involucradas en los mecanismos reguladores de la inflamación. Recientemente hemos descrito cambios en la inmunoexpresión de la HSP90 en el endometrio de yeguas, lo que sugiere un papel regulador durante el ciclo estral. Asimismo, la HSP90 está regulada por el factor HSF-1. Sin embargo, hasta donde sabemos no se han realizado estudios de la expresión de ambas proteínas HSP90 y HSF-1 en la endometritis fisiológica post-inseminación. Por lo tanto, en una primera etapa se analizó la inmunoexpresión de HSF-1 en biopsias de endometrio de yeguas sanas durante el estro (n=5), el diestro (n=7) y el anestro (n=7). En una segunda etapa se analizó la inmunoexpresión de las proteínas HSF-1 y HSP90 en el endometrio de yeguas a las 2 (n=8) y 4 horas (n=6) post-inseminación, y en estro sin inseminar (grupo control: n=16). Se determinó la localización y se cuantificó la inmunoexpresión, porcentaje de área inmunomarcada (%) de HSF-1 y HSP90 en el epitelio de revestimiento y en las glándulas endometriales por inmunohistoquímica y análisis de imágenes (FIJI). Durante el ciclo estral y el anestro el factor HSF-1 se inmunoexpresó en el epitelio de revestimiento y en las glándulas endometriales, a nivel del citoplasma y a nivel nuclear. La inmunoexpresión de HSF-1 fue mayor en el diestro en comparación con el estro y el anestro (7,9 ± 0,2%, 5,1 ± 0,2%, 1,9 ± 0,2%; p˂0,0001). La inmunoexpresión de HSF-1 a las 2 y 4 horas post-inseminación se localizó tanto en el núcleo como en el citoplasma del epitelio del revestimiento endometrial y de las glándulas endometriales. La inmunoexpresión de HSF-1 a las 2 horas post-inseminación fue menor con respecto al grupo control (2,34 ± 0,35%, 5,13 ± 0,19%; p˂0,0001). La inmunoexpresión de HSP90 fue mayor en las glándulas endometriales a las 2 y 4 horas post-inseminación (4,92 ± 0,24%, 3,72 ± 0,37%) en comparación con el grupo control (1,62 ± 0,28%; p= 0,0001). Esto indica un aumento de HSP90 a las 2 horas post inseminación mientras que a las 4 h post inseminación disminuye. La localización del HSF-1 en el citoplasma sugiere la acción de chaperona, y la localización en el núcleo implica procesos reguladores del ADN como factor de transcripción. Hasta donde sabemos, esta es la primera descripción de la localización celular y tisular del HSF-1 y HSP90 en el endometrio equino normal y post-inseminación. Los altos niveles de inmunoexpresión del HSF-1 durante el diestro (fase lútea) son consistentes con un papel en la preparación del endometrio para la implantación y el desarrollo del embrión. Concluimos que tanto la HSP90 como HSF-1 se expresan en las primeras horas en la endometritis post inseminación en la yegua con un rol clave en el control de la inflamación para posibilitar una futura placentación.