Estudio de mecanismos moleculares asociados a la proliferación y sobrevida del clon tumoral en la Leucemia Linfoide Crónica : hacia la identificación de un posible blanco terapéutico

Abstract

La Leucemia Linfoide Crónica (LLC) es una neoplasia caracterizada por la acumulación de Linfocitos B (LB) maduros en sangre periférica, médula ósea y órganos linfoides secundarios (OLS). Es la leucemia más frecuente en adultos de países occidentales, y afecta principalmente a individuos mayores de 50 años. Esta enfermedad presenta una evolución clínica heterogénea, donde si bien hay un grupo de pacientes que se mantienen con una LLC estable desde su diagnóstico sin requerir tratamiento, existen otros que debutan o progresan con una enfermedad más agresiva, observándose con frecuencia resistencia o recaídas posterior a la terapia. Por lo que, en la actualidad la LLC sigue considerándose una patología incurable. El estudio de los mecanismos moleculares que conllevan a la progresión de la enfermedad permite identificar nuevos blancos terapéuticos que podrían redundar en el hallazgo de un mejor tratamiento que cure definitivamente esta leucemia y/o mejore la calidad de vida de los pacientes. El microambiente tumoral juega un rol fundamental en la fisiopatología de la LLC. La interacción de células no B con el linfocito leucémico provee señales que conlleva a la sobrevida y/o proliferación del clon tumoral. En el año 2005, Messmer y col. describieron que en la LLC existe una subpoblación celular con alta capacidad proliferativa. Acorde con esto, nuestro grupo identificó en la sangre periférica de pacientes con pronóstico desfavorable la presencia de una fracción proliferante (FP) con un activo cambio de clase y expresión de la enzima deaminasa de citidina inducida por activación (AID). Posteriormente, otras FPs expresando la enzima AID como una señal de activación linfocitaria también han sido descritas en pacientes con mala evolución clínica. Y dado a su actividad mutagénica, AID ha sido asociada a la generación de mutaciones puntuales en el ADN y translocaciones cromosómicas en linfomas de células B. La presencia de estas FP con una expresión anómala de AID en la sangre periférica de pacientes con una enfermedad progresiva nos lleva a hipotetizar que esta enzima podría estar relacionada con el origen de las aberraciones cromosómicas de mal pronóstico en la LLC. En este trabajo demostramos que la FP IgMpos/IgGpos se asocia al desarrollo de una enfermedad más agresiva y que esta subpoblación pareciera ser la primera en adquirir la del11q que conlleva a la pérdida del gen ATM, siendo dicha alteración cromosómica asociada a la refractariedad terapéutica en la LLC. De igual manera, nuestros resultados muestran que las FP y la expresión de AID se ven afectados por el tratamiento con Ibrutinib, un inhibidor de la enzima tirosina quinasa de Brutón que ha sido recientemente aprobado por la FDA para el tratamiento de la LLC. Además, los resultados de esta tesis proveen datos originales sobre un mecanismo alternativo al previamente descrito para esta droga sobre el clon leucémico. Demostrando así que la disminución de la enzima AID luego del tratamiento con ibrutinib estaría originada en la desactivación de la vía IL-4/JAK/STAT6. En una segunda parte de la tesis nuestros esfuerzos fueron dirigidos al estudio del proceso inflamatorio en los pacientes progresores con LLC y como moléculas implicadas en la activación del inflamasoma podrían convertirse en nuevos blancos terapéuticos. Si bien, la presencia de un microambiente tumoral activado favorece el desarrollo de una LLC más agresiva. También ha sido descrito una paradójica regulación del sistema inmune en esta leucemia, donde una modulación negativa de la respuesta inflamatoria puede promover el crecimiento tumoral y tolerancia inmunológica. En este sentido nuestros resultados muestran que la sobreexpresión de la proteína TMEM176A conlleva a menos actividad del inflamasoma y resistencia a la piroptosis en la LLC, postulando la hipótesis de que las células tumorales de pacientes con un desarrollo agresivo de LLC podrían aumentar la expresión de TMEM176A para escapar de la muerte celular programada. Finalmente, este trabajo propone que la modulación farmacológica de TMEM176A podría ser utilizada como un complemento junto con drogas como Venetoclax o Ibrutinib en la terapia para esta leucemia. Los resultados en células humanas leucémicas, así como en un modelo murino de LLC, mostrados en este trabajo de tesis proveen un aporte racional a esta hipótesis y dejan planteada una nueva perspectiva terapéutica para esta leucemia.