Expresión y detección de mutaciones en los genes BRAF, SMO, PTCH1, CTNNB1, CAV1 y expresión de las proteínas Ki-67, Caveolina 1, MOC-31 y Conexina 43 en el Fibroma ameloblástico, Fibrodentinoma ameloblástico, Fibro-odontoma ameloblástico y Odontoma.

Abstract

El estudio de los tumores odontogénicos (TO), como el fibroma ameloblástico (FA), el fibrodentinoma ameloblástico (FDA), el fibro-odontoma ameloblástico (FOA) y el odontoma (O), resulta de particular interés debido a su localización exclusiva en la región maxilofacial y a las implicancias terapéuticas que pueden derivar en tratamientos radicales. En este contexto, el odontólogo cumple un rol clave en la detección temprana de estas lesiones. Sin embargo, la falta de una clasificación homogénea y las modificaciones introducidas por la Organización Mundial de la Salud en 2017 y 2022 dificultan la comprensión epidemiológica y biológica de estos tumores, especialmente en lo que respecta a la naturaleza de entidades como el FOA y el FDA, cuya independencia como neoplasias continúa siendo motivo de debate, debido a que fueron eliminadas como entidades independientes e incluidas como estadios evolutivos del O. El presente trabajo tuvo como objetivo principal analizar la inmunoexpresión de las proteínas Ki-67, Cav-1, MOC-31 y Cx-43, así como la expresión génica y la presencia de mutaciones en los genes BRAF, SMO, PTCH1, CAV1 y CTNNB1 en FA, FDA, FOA y O. Se realizó un estudio observacional, analítico, transversal y retrospectivo sobre una muestra de 20 casos (8 FA, 5 FOA, 1 FDA y 6 O) provenientes del archivo del Laboratorio de Anatomía Patológica de la Facultad de Odontología (UdelaR) del Departamento de Diagnóstico en Patología y Medicina Oral. Se emplearon técnicas inmunohistoquímicas y de biología molecular, junto con análisis estadísticos apropiados, para evaluar asociaciones entre variables clínico-patológicas y los perfiles de expresión observados. Los resultados evidenciaron que los TO se presentaron con mayor frecuencia en mandíbula, en pacientes jóvenes y predominantemente en hombres. A nivel inmunohistoquímico, se observaron diferencias significativas en la expresión de biomarcadores entre los distintos tipos tumorales, destacándose que los FA, FDA y FOA compartieron perfiles de expresión similares entre sí, mientras que los O mostraron niveles de expresión menores. Este patrón sugiere un comportamiento biológico diferencial entre estas entidades. Asimismo, se observó una tendencia a la disminución de la expresión de los biomarcadores con la edad, particularmente para MOC-31 y Cav-1. En relación con el análisis genético, los resultados mostraron patrones heterogéneos de expresión génica, con ausencia, niveles basales y leves variaciones de sobreexpresión o subexpresión según el tipo tumoral. Aunque no se alcanzó significación estadística, se identificaron tendencias que diferencian a los FA, FDA y FOA de los O. En cuanto al análisis mutacional, no se detectaron mutaciones previamente reportadas en los genes PTCH1, SMO, CTNNB1 y CAV1. Sin embargo, el gen BRAF presentó la mutación V600E en todos los casos de FA, FDA y FOA, mientras que los O mostraron exclusivamente la variante wild-type, lo que refuerza la existencia de diferencias moleculares entre estos grupos. En conjunto, estos hallazgos aportarían evidencia que sugiere que, si bien no se identificaron mutaciones en algunos genes clave, existen patrones de expresión e inmunoexpresión compartidos entre algunos de los FA, FDA y FOA que los diferencian de los O. Estas similitudes, aunque sin significación estadística, podrían constituyen hallazgos exploratorios que podrían orientar futurras investigaciones destinadas a esclarecer su relevancia biológica. La ausencia de resultados estadísticamente significativos podría atribuirse, al menos en parte, al tamaño muestral limitado, lo cual constituye una de las principales limitaciones. No obstante, este estudio sienta las bases para futuras investigaciones con mayor número de casos, orientadas a profundizar en los mecanismos moleculares implicados y a contribuir a una clasificación más precisa de los TO.

The study of odontogenic tumors (OT), such as ameloblastic fibroma (AF), ameloblastic fibrodentinoma (AFD), ameloblastic fibro-odontoma (AFO), and odontoma (O), is of particular interest due to their exclusive location in the maxillofacial region and the therapeutic implications that can lead to radical treatments. In this context, dentists play a key role in the early detection of these lesions. However, the lack of a standardized classification and the modifications introduced by the World Health Organization in 2017 and 2022 hinder the epidemiological and biological understanding of these tumors, especially regarding the nature of entities such as AFO and AFD, whose independent status as neoplasms remains a subject of debate. The main objective of this work was to analyze the immunoexpression of the Ki-67, Cav-1, MOC-31 and Cx-43 proteins, as well as gene expression and the presence of mutations in the BRAF, SMO, PTCH1, CAV1 and CTNNB1 genes in FA, FDA, FOA and O. An observational, analytical, cross-sectional, and retrospective study was conducted on a sample of 20 cases from the archives of the Pathology Laboratory of the Faculty of Dentistry (UdelaR). Immunohistochemical and molecular biology techniques, along with appropriate statistical analyses, were used to evaluate associations between clinicopathological variables and the observed expression profiles. The results showed that odontogenic tumors OT was more frequently found in the mandible, in young patients, and predominantly in men. At the immunohistochemical level, significant differences in biomarker expression were observed among the different tumor types. Notably, FA, FDA, and FOA tumors shared similar expression profiles, while O tumors showed lower expression levels. This pattern suggests differential biological behavior among these entities. A trend toward decreased biomarker expression with age was also observed, particularly for MOC-31 and Cav-1. Regarding the genetic analysis, the results showed heterogeneous gene expression patterns, with absence, basal levels, and slight variations of overexpression or under expression depending on the tumor type. Although statistical significance was not reached, trends were identified that differentiate FA, FDA, and FOA tumors from O tumors. As for the mutational analysis, no mutations were detected in the PTCH1, SMO, CTNNB1, and CAV1 genes. Regarding mutational analysis, no previously reported mutations were detected in the PTCH1, SMO, CTNNB1, and CAV1 genes. However, the BRAF gene presented the V600E mutation in all cases of FA, FDA, and FOA, while the O group exclusively showed the wild-type variant, reinforcing the existence of molecular differences between these groups. Taken together, these findings provide evidence suggesting that, although mutations were not identified in some key genes, there are shared expression and immunoexpression patterns among some of the FA, FDA, and FOA groups that differentiate them from the O group. These similarities, although not statistically significant, could have predictive value and contribute to a better understanding of their biological behavior. The lack of statistically significant results could be partly explained by the limited sample size. Nevertheless, this study lays the groundwork for future research with a larger number of cases, aimed at further investigating the molecular mechanisms involved and contributing to a more precise classification of TO.