Preparando el terreno para modular la vía de vesiculación cloroplástica en soja mediante CRISPR/Cas9

Abstract

El déficit hídrico constituye uno de los principales factores limitantes del rendimiento de la soja (Glycine max), particularmente en escenarios asociados al cambio climático. La senescencia foliar inducida por estrés representa un mecanismo de escape que, si bien asegura la reproducción, compromete la productividad al reducir la duración de la fase fotosintética. Estudios previos identificaron a la proteína Chloroplast Vesiculation 1 (CV1) de soja, con un rol clave en la degradación de cloroplastos durante la senescencia inducida por estrés, mostrando una correlación negativa entre su expresión y la tolerancia a la sequía. En este contexto, el presente trabajo tuvo como objetivo generar variantes editadas del promotor de CV1 (proCV1) mediante CRISPR/Cas9, utilizando Arabidopsis thaliana como sistema modelo heterólogo. Se diseñaron ARN guías (gRNAs) dirigidos a elementos cis-reguladores identificados in silico y se generaron ocho construcciones para la edición simultánea de regiones específicas del promotor. Las construcciones fueron introducidas en una línea transgénica proCV1:GUS, que permitirá evaluar el impacto de las deleciones detectadas en proCV1 evaluando la actividad del gen reportero GUS. Este trabajo propone un abordaje novedoso para identificar regiones del promotor relevantes para regular la expresión de CV1 en respuesta al estrés. A su vez, el trabajo sienta las bases para el diseño de una estrategia de modulación fina de la expresión génica basada en edición del promotor, orientada a reducir la senescencia inducida por estrés sin alterar la senescencia natural, constituyendo una herramienta potencial para el mejoramiento de cultivos frente a condiciones ambientales adversas.