Caracterización molecular de aislamientos de Klebsiella pneumoniae causantes de infecciones hospitalarias

Abstract

Desde el 2007 en Uruguay, se viene observando una alta frecuencia de aislamientos de K. pneumoniae productores de β-lactamasas de espectro extendido (BLEE), con fenotipo de resistencia a múltiples drogas (RMD), provenientes de pacientes hospitalizados. Considerando que el grupo de investigación ha demostrado la co-movilización de genes blaCTX-M-2 con otras regiones de ADN codificantes para la resistencia a otros antibióticos mediada por elementos genéticos móviles (EGM) como plásmidos, integrones, y secuencias de inserción, el objetivo de este trabajo fue continuar con el análisis de las poblaciones de K. pneumoniae de origen intrahospitalario en base a la variedad de BLEE, fenotipo RMD y contenido de EGM. Para ello se analizaron 26 aislamientos de K. pneumoniae provenientes de pacientes hospitalizados durante marzo-mayo del 2011 en Uruguay. Se realizó la identificación mediante VITEK 2 GN y la detección fenotípica de BLEE por ensayo de sinergia con doble disco para AMC, CTX y CAZ. Se estudió la sensibilidad a los antibióticos FOX, CAZ, CTX, FEP, AMK, CIP, GEN, IPM mediante VITEK 2 AST-N082. La amplificación del gen blaCTX-M , del gen intI1 y de las secuencias de inserción ISEcp1 e IS26 se realizó por PCR con el uso de cebadores específicos. La relación genética entre los aislamientos fue evaluada por electroforesis en gel por campo pulsante utilizando la enzima XbaI. Se analizaron los grupos de incompatibilidad Inc A/C, Inc FII e IncN por Inc/rep PCR. Doce de 26 aislamientos fueron productores de BLEE de los cuales 11 portaron la variante blaCTX-M-15 y el otro no amplificó para la familia CTXM. Se observaron 2 pulsotipos, uno de ellos fue idéntico al presentado por un aislamiento de K. pneumoniae aislado en 2008. Todos los aislamientos fueron resistentes a CIP, SXT, CTX, CAZ y uno fue además resistente a AMK y FOX. Todos fueron sensibles a GEN e IPM y presentaron la secuencia de inserción ISEcp1 así como la IS26. Nueve portaron integrones de clase 1. Los grupos de incompatibilidad plasmídica buscados no rindieron producto de amplificación. En suma, si bien continúa predominando la familia CTX-M se observó un cambio hacia la variante genética blaCTX-M-15. Estarían circulando 2 poblaciones clonales con fenotipo RMD y una de ellas estaría adaptada a persistir en este ambiente hospitalario desde el 2008. Debido a que las estrategias terapéuticas están limitadas a los carbapenemes es importante vigilar la sensibilidad a los mismos y su evolución. K. pneumoniae podría ser un reservorio de EGM comúnmente involucrados en la diseminación de fenotipos RMD.