Desarrollo de herramientas para enfrentar la resistencia de la garrapata Rhipicephalus microplus

Abstract

La parasitosis por la garrapata Rhipicephalus microplus (R. microplus) puede representar una limitante para la producción bovina desde el punto de vista sanitario, así como económico. Por lo tanto, es muy importante su control, el cual se ha visto desafiado por la selección hacia la resistencia a los diferentes principios activos habilitados en Uruguay al punto de diagnosticarse poblaciones multirresistentes. Para sortear esta dificultad es que existen diferentes bioensayos que se utilizan de rutina y permiten determinar el perfil de resistencia de una población de R. microplus, lo que brinda una orientación más precisa para su tratamiento. Sin embargo, estos llevan aproximadamente 60 días en brindar resultados. La resonancia magnética nuclear es una técnica que nos permite elucidar las moléculas de una muestra, como pueden ser los metabolitos. De esta manera, mediante un estudio metabolómico, se podrían identificar diferencias entre muestras de garrapatas resistentes y susceptibles a los diferentes grupos químicos garrapaticidas. Disponer de esta herramienta para el diagnóstico de resistencia podría acortar los tiempos de obtención de resultados. Además de abordar el diagnóstico es necesario contar con nuevas entidades químicas para el tratamiento garrapaticida. Para ello el estudio de moléculas en proteínas blanco es un camino a seguir. En este sentido las enzimas Triosa fosfato isomerasa y la Glutatión S transferasa son importantes en el metabolismo de la garrapata. Por lo tanto, identificar moléculas que presenten actividad inhibitoria de estas, resulta en un importante primer paso en la búsqueda y detección de moléculas con poder garrapaticida. En este trabajo se logró desarrollar un método de diagnóstico que diferencia garrapatas susceptibles de resistentes en 7 días, además se identificaron moléculas con inhibición selectiva de enzimas esenciales de la garrapata que demostraron actividad garrapaticida en larvas y adultas.

Parasitosis caused by Rhipicephalus microplus (R. microplus) tick can signify a limitation for bovine production systems from a health and economic point of view. However, its control, which turns out to be a very important issue, has been challenged by the emergence of resistance to the different active ingredients registered in Uruguay. So much so that currently multi-resistant populations have been diagnosticated. In order to get around this problem different bioassays exist that are routinely used and allow us to determine the resistance profiles of a R. microplus population, giving a more precise orientation for its treatment. However, these results take approximately 60 days in giving the results. Nuclear magnetic resonance is a technique that allows the elucidation of molecules of a sample, such as metabolites. This way, differences between samples of susceptible and resistant ticks, to the different active ingredients, could be identified. Having this tool could shorten times for obtaining results once the sample has been received. Besides addressing the diagnosis problem, it is also necessary to count on new chemical entities for the tickicide treatments. Therefore, the study of molecules on the activity of blank proteins is one way to pursue. Thus Triosephosphate-isomerase and Glutathione S tranferase are two important enzymes on ticks´ metabolism. To identify molecules which present an inhibitory activity of these enzymes results on an important first step on the search and detection of molecules with a tickicide effect. This study managed to develop a diagnostic method that allows to differentiate susceptible from resistant tick populations on 7 days. Besides it has identified molecules with selective enzyme inhibition, on enzymes which are essential for ticks, as well as showing tickicide activity on adult and larvae ticks.