Desarrollo de una sonda fluorescente roja (red-b) para la detección intracelular de peroxinitrito

Abstract

En la última década se han desarrollado sondas fluorescentes derivadas de ésteres o ácidos borónicos para la detección de peroxinitrito en sistemas biológicos. Esto resultó en un importante avance en el área de biología redox debido a su capacidad para reaccionar en forma cinéticamente selectiva con esta especie. Los fluoróforos más utilizados hasta el momento presentan diferente grado de sensibilidad a cambios de pH, de presión parcial de O2 y pueden sufrir autoxidación, lo que puede afectar las determinaciones en algunos modelos experimentales. En el contexto del estudio de la formación de especies oxidantes en modelos celulares que contemplen cambios en el microambiente celular, es importante contar con sondas que sean estables frente a dichas variables fisicoquímicas. En este trabajo se describe la síntesis y caracterización de una nueva sonda, Red-B, diseñada a partir de un derivado de xanteno acoplando un éster borónico. Esta sonda, al reaccionar con peroxinitrito rinde el correspondiente producto hidroxilado fluorescente, Red-Ox. El estudio de la distribución intracelular de Red-B, así como la eficiencia de Red-Ox en sistemas celulares expuestos a distintas presiones parciales de O2, nos permitirá completar la validación de la sonda para su futura aplicación.