Análisis del ER membrane complex (EMC) de Aspergillus nidulans: deleción de las subunidades EMC4, EMC5 y EMC6

Abstract

Aproximadamente un 25% de los genes que codifican para proteínas en todos los organismos, codifican para proteínas transmembrana. Estas proteínas participan en una gran variedad de procesos biológicos como el transporte de nutrientes y la transducción de señales. Las mismas se caracterizan por atravesar la membrana mediante segmentos transmembrana (STM), y defectos en sus funciones están asociadas a diversas enfermedades, patologías, y a la sensibilidad a drogas, lo que deja en evidencia que son de suma importancia. Tanto la inserción de los STM como el ensamblaje con otros STM son procesos determinantes en la biogénesis de dichas proteínas. Recientemente, se identificó un complejo multiproteico abundante y ampliamente conservado en organismos eucariotas, denominado ER membrane complex (EMC), el cual está asociado en los procesos anteriormente mencionados. Se observó que la pérdida de función del EMC se asocia con defectos en la homeostasis del colesterol, la formación de autofagosoma, defectos neurológicos, entre otros. Por lo tanto, entender cómo funciona este complejo es de suma importancia. Es por esto, que buscamos contribuir al conocimiento del mismo, mediante su caracterización genética y bioquímica en el hongo ascomicete modelo Aspergillus nidulans. Mediante análisis bioinformáticos se identificaron seis posibles subunidades de este complejo en dicho organismo. En este trabajo se realizó la deleción de los genes que codifican para tres de las seis subunidades identificadas (EMC4, EMC5, EMC6). Se analizó el efecto de la ausencia de las mismas mediante ensayos de crecimiento en placa, como también se observo el fenotipo mediante microscopía. Lo cual revelaron la importancia de las subunidades del complejo.