Efectos del peróxido de hidrógeno en el metabolismo de glóbulos rojos humanos y análisis de variantes de hemoglobina

Abstract

Los glóbulos rojos cumplen una función indispensable en el transporte de oxígeno a los tejidos gracias a las altas concentraciones de hemoglobina que contienen. Estas células se hallan expuestas en circulación a especies reactivas derivadas del oxígeno y nitrógeno, por lo que cuentan con robustos sistemas antioxidantes que los protegen. Dichos sistemas dependen de distintos cofactores, siendo el NADPH uno de los más relevantes. Esta molécula es sintetizada en glóbulos rojos únicamente por la vía de las pentosas fosfato, ruta metabólica que compite con la glucólisis en la metabolización de la glucosa. Estudios recientes señalan que el flujo de glucosa destinado a la vía de las pentosas fosfato aumenta con el transcurso de los días en glóbulos rojos almacenados para transfusión, en detrimento del destinado a la glucólisis. Mediante esta reprogramación metabólica, los glóbulos rojos podrían aumentar la producción de NADPH en pos de suministrar poder reductor a los sistemas antioxidantes y así enfrentar la acumulación de especies oxidantes durante el almacenamiento. En el presente trabajo se estudiaron los efectos del peróxido de hidrógeno en la producción de lactato en glóbulos rojos humanos, bajo la hipótesis de que podría ocurrir una reprogramación metabólica similar a la reportada en glóbulos rojos almacenados. No se encontraron diferencias entre el grupo control y los grupos tratados con peróxido de hidrógeno. Además, se optimizó un método de ciclado enzimático para cuantificar NADP+ y NADPH satisfactoriamente, siendo el mismo empleado por compañeros del laboratorio en sus líneas de investigación. Por otro lado, se analizaron muestras de sangre enviadas por la Intendencia de Montevideo en búsqueda de portadores de la variante hemoglobina S, responsable de la anemia falciforme. Se empleó un método de cromatografía de intercambio catiónico en HPLC que permitió determinar que ninguna de las muestras brindadas poseía la variante responsable de la enfermedad.