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Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem: https://hdl.handle.net/20.500.12008/28483 Cómo citar
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Campo DC Valor Lengua/Idioma
dc.contributor.authorQuintero Gil, C.-
dc.contributor.authorMirazo, Santiago-
dc.contributor.authorParra Suescun, J.-
dc.contributor.authorLópez Herrera, A.-
dc.contributor.authorMainardi, Victoria-
dc.contributor.authorArbiza, Juan-
dc.contributor.authorOrduz, S.-
dc.contributor.editorNavas, M.C.-
dc.date.accessioned2021-07-07T14:39:01Z-
dc.date.available2021-07-07T14:39:01Z-
dc.date.issued2019-
dc.identifier.citationQuintero Gil , C, Mirazo, S, Parra Suescun, J. y otros "Cell culture isolation of Hepatitis E Virus Genotype 3 Strain obtained from human feces". Acta Biológica Colombiana. [en línea] 2019, 24(3): 503-508. 6 h. DOI: 10.15446/abc.v24n3.79351es
dc.identifier.issn1900-1649-
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/20.500.12008/28483-
dc.description.abstractHepatitis E virus (HEV) is considered one of the leading causes of acute viral hepatitis worldwide, and about 20 million infections and approximately 57 000 deaths occurred every year. However, little is known about the replicative virus cycle due to the absence of a consensus cell culture model. A549 cell line is considered susceptible to HEV genotype 3, however, both viral strain and cell culture conditions could affect the viral isolation in vitro. The objective of this work was to isolate in vitro an HEV-3 strain obtained from human feces. To this, a genotype 3 HEV strain previously identified by genetic characterization was inoculated in A549 monolayers, and incubated for two hours at 37 °C. Five days post-infection, cells were passaged (subcultured) for the first time, and serial passages were done on average every four days during 41 days. HEV replication was evaluated through RT-qPCR in each passage, and reinfection of the cell line with the viral progeny derived from A549 infected monolayers was assessed through immunofluorescence and RT-qPCR. Viral RNA was detected in each passage from infected monolayers, and the highest amount was found after 26 days (2 x 106 copies/μL). In reinfection assay, capsid antigen was detected perinuclearly and forming foci, and 1x104 copies/μL of viral RNA was detected after 96 hours post infection. This shows that HEV recovered from the cell lysate monolayers was infectious. This viral isolate offers a critical tool to study the unknown aspect of HEV infection.en
dc.description.abstractEl virus de la hepatitis E (HEV) se considera como una de las principales causas de hepatitis viral aguda en el mundo; cada año ocurren aproximadamente 20 millones de infecciones y 57 000 muertes. Debido a la ausencia de un modelo de cultivo celular consenso, se sabe poco sobre el ciclo replicativo del virus. La línea celular A549 se considera susceptible al genotipo 3 de HEV, pero tanto la cepa viral como las condiciones del cultivo celular podrían afectar el aislamiento viral in vitro. Por tanto nos propusimos aislar in vitro una cepa genotipo 3 del HEV. Para ello, se inocularon células A549 con una cepa HEV-3 identificada previamente por caracterización genética, y se incubó durante dos horas a 37 °C. Cinco días después de la infección, las células se pasaron (subcultivaron) por primera vez, y se realizaron pases seriados cada cuatro días en promedio, durante 41 días. En cada pase se evalúo la replicación del HEV mediante RT-qPCR. La reinfección de la línea celular con progenie viral derivada de monocapas de A549 infectadas se evaluó mediante inmunofluorescencia y RT-qPCR. Se detectó ARN viral en cada pase a partir de monocapas, y el pico máximo se alcanzó a los 26 días post infección (2 x 106 copias/μL). En el ensayo de reinfección, se detectó antígeno de cápside perinuclearmente y formando focos, y se detectaron 1 x 104 copias/μL de RNA viral a las 96 horas post infección. El HEV recuperado de lisado de monocapas fue infeccioso. Este aislado viral ofrece una herramienta importante para estudiar aspectos desconocidos de la infección por HEV.es
dc.format.extent6 h.es
dc.format.mimetypeapplication/pdfes
dc.language.isoenes
dc.publisherUniversidad Nacional de Colombiaes
dc.relation.ispartofActa Biológica Colombiana, 2019, 24(3): 503-508es
dc.rightsLas obras depositadas en el Repositorio se rigen por la Ordenanza de los Derechos de la Propiedad Intelectual de la Universidad de la República.(Res. Nº 91 de C.D.C. de 8/III/1994 – D.O. 7/IV/1994) y por la Ordenanza del Repositorio Abierto de la Universidad de la República (Res. Nº 16 de C.D.C. de 07/10/2014)es
dc.subjectA549 cellsen
dc.subjectHepevirusen
dc.subjectIsolationen
dc.subjectRNA virusen
dc.titleCell culture isolation of Hepatitis E Virus Genotype 3 Strain obtained from human fecesen
dc.title.alternativeAislamiento de una cepa genotipo 3 del virus de la hepatitis E obtenida de heces humanases
dc.typeArtículoes
dc.contributor.filiacionQuintero Gil C.-
dc.contributor.filiacionMirazo Santiago, Universidad de la República (Uruguay). Facultad de Ciencias. Instituto de Química Biológica.-
dc.contributor.filiacionParra Suescun J.-
dc.contributor.filiacionLópez Herrera A.-
dc.contributor.filiacionMainardi Victoria-
dc.contributor.filiacionArbiza Juan, Universidad de la República (Uruguay). Facultad de Ciencias. Instituto de Biología-
dc.contributor.filiacionOrduz S.-
dc.rights.licenceLicencia Creative Commons Atribución (CC - By 4.0)es
dc.identifier.doi10.15446/abc.v24n3.79351-
Aparece en las colecciones: Publicaciones académicas y científicas - Facultad de Ciencias

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