Reúne las tesis de Maestría y Doctorado https://hdl.handle.net/20.500.12008/38 2026-05-19T15:21:00Z 2026-05-19T15:21:00Z Migues Borghini, Ignacio https://hdl.handle.net/20.500.12008/54938 2026-05-12T13:37:46Z 2026-01-01T00:00:00Z

Título: Aplicación transversal del análisis metabolómico al sistema productivo de mandarinas Autor: Migues Borghini, Ignacio Resumen: Esta tesis se basa en el uso del análisis metabolómico como herramienta para la mejora genética y la comprensión de procesos fisiológicos en mandarinas, aspectos clave en este cultivo de alto valor económico. El objetivo central fue explorar, mediante enfoques no-dirigidos y dirigidos, los perfiles químicos de distintos órganos de la planta, inlcuyendo pulpa, cáscara, hojas y ovarios, y vincularlos con atributos de aceptabilidad sensorial, resistencia a enfermedades, alternancia productiva y respuesta a técnicas de cultivo. xii En la pulpa se aplicó espectroscopía de resonancia magnética nuclear de protón (¹H RMN) para caracterizar metabolitos hidrosolubles (azúcares y ácidos orgánicos) y correlacionarlos con la aceptabilidad sensorial de consumidores. Se desarrollaron modelos quimiométricos robustos que mostraron una alta correlación entre el cociente poder edulcorante/ácido cítrico y la preferencia del consumidor, demostrando la viabilidad para predecir objetivamente la calidad organoléptica mediante 1H RMN. La metodolgía se pudo transferir a equipos de 1H RMN de mesada, haciéndolo una herramienta accesible para programas de mejoramiento. La compleja matriz química de la cáscara se exploró en dos etapas. Primero, un estudio nodirigido mediante ¹H RMN permitió discriminar variedades a partir de pectinas, azúcares y compuestos lipofílicos, y sugirió un rol de los ácidos y alcoholes grasos en la resistencia al cancro cítrico. Posteriormente, un enfoque dirigido mediante GC-MS confirmó la importancia de la composición de las ceras epicuticulares. Las variedades resistentes presentaron un predominio de alcanos protectores, mientras que las susceptibles mostraron mayor proporción de alcoholes grasos, asociados a mayor permeabilidad cuticular. El análisis de hojas se centró en la alternancia productiva, una práctica que limita la rentabilidad citrícola. La caracterización no-dirigida mediante ¹H RMN distinguió los estados productivos y no productivos, identificando acumulación diferencial de carbohidratos, prolina y ácidos orgánicos según la fase fenológica. El análisis dirigido mediante LC-MS/MS confirmó diferencias en polifenoles y limonoides, sugiriéndolos como posibles biomarcadores de alternancia. La segunda parte de la tesis se enfocó en la variedad Afourer. Mediante la integración de datos de rendimiento productivo y de análisis metabolómicos de RMN se evaluó el impacto de técnicas de cultivo, como ser mallado, aplicación de ácido giberélico y polinización mediante abjeas, sobre la producción, la calidad del fruto y el desarrollo de ovarios. La betaína, una amina cuaternaría con conocida función osmoprotectora en plantas, fue clave en las primeras etapas de desarrollo. Se desarrolló además un estudio dirigido de giberelinas en ovarios mediante LCMS/ MS que mostró que la GA1 es una hormona clave para el desarrollo de este órgano, con variaciones significativas a lo largo del proceso de maduración del mismo. xiii El trabajo demuestra el valor del análisis metabolómico aplicado a cítricos como herramienta de diagnóstico temprano, selección varietal y apoyo a la gestión agronómica. La combinación de enfoques no-dirigidos y dirigidos permitió identificar quimiomarcadores asociados a la aceptabilidad del consumidor, la resistencia a enfermedades y la alternancia productiva, contribuyendo a una citricultura más eficiente, sostenible y orientada a la calidad.

2026-01-01T00:00:00Z Mattos Mendoza, Natalia https://hdl.handle.net/20.500.12008/54627 2026-04-28T12:30:23Z 2026-01-01T00:00:00Z

Título: Potencial antimicrobiano de mieles de Montes del Queguay Autor: Mattos Mendoza, Natalia Resumen: La miel es un producto natural de uso milenario, elaborado por las abejas melíferas (Apis mellifera L.) a partir del néctar floral o de secreciones de tejidos vegetales vivos, lo que da lugar, respectivamente, a mieles florales (de néctar) y a mieles de mielada. En el mercado internacional, la miel se considera un producto de alto valor agregado, particularmente cuando está diferenciada por su origen botánico, composición funcional o propiedades terapéuticas. Esto evidencia la necesidad en Uruguay de generar conocimiento sobre atributos diferenciales, especialmente en relación con su composición, origen floral y potencial bioactivo. Al mismo tiempo, debido a la creciente resistencia antimicrobiana, se ha renovado la atención sobre productos naturales como la miel, por su capacidad para controlar microorganismos patógenos o multirresistentes a antimicrobianos. Su actividad iv antimicrobiana está estrechamente vinculada a la composición química, la cual depende del origen floral, las condiciones ambientales y el manejo apícola. En este contexto, la región de Montes del Queguay en Paysandú, representa un ambiente propicio para la producción de mieles singulares por su entorno florístico y por ser un área protegida con alta biodiversidad y bajo nivel de intervención antrópica, predominando flora nativa. En los últimos años, varios apicultores han trasladado sus colmenas a esta zona con el objetivo de producir mieles puras de monte, potencialmente distintivas por su perfil composicional y funcional. Sin embargo, estas mieles aún no han sido suficientemente estudiadas desde una perspectiva integral. Por lo tanto, esta tesis tuvo como objetivo caracterizar mieles de Montes del Queguay en función de su origen botánico, composición fisicoquímica y actividad antimicrobiana. Los resultados mostraron que se originan principalmente a partir de flora nativa, que cumplieron con los parámetros fisicoquímicos establecidos por la normativa vigente y que presentaron actividad antimicrobiana frente a las bacterias evaluadas, además de capacidad para inhibir la formación de biofilm. Estos resultados obtenidos contribuyen a la valorización de estas mieles, al permitir explorar la relación entre actividad antimicrobiana, variables fisicoquímicas y origen botánico, y aportar evidencia que sustenta su potencial valorización comercial y posibles aplicaciones terapéuticas futuras.

2026-01-01T00:00:00Z Raffaelli Bertolotti, María Sofía https://hdl.handle.net/20.500.12008/54295 2026-04-13T12:25:46Z 2025-01-01T00:00:00Z

Título: Nuestros aliados naturales : búsqueda de nuevos antimicrobianos a partir de productos naturales / Autor: Raffaelli Bertolotti, María Sofía Resumen: Las plantas y los microorganismos han sido históricamente una fuente clave de metabolitos secundarios con aplicaciones terapéuticas, alimenticias y tecnológicas. Muchos de estos compuestos poseen propiedades antimicrobianas, entre ellos polifenoles, alcaloides, terpenoides y péptidos, que actúan mediante diversos mecanismos como la inhibición enzimática, la alteración de membranas o la interferencia en la síntesis de macromoléculas. Además, ciertos metabolitos potencian la acción de antimicrobianos conocidos o interfieren en factores de virulencia como la formación de biofilms y la comunicación celular por quorum-sensing. Debido a la creciente resistencia antimicrobiana, los extractos naturales, ricos en múltiples moléculas bioactivas, representan una alternativa prometedora, ya que su diversidad favorece efectos sinérgicos y reduce la probabilidad de aparición de resistencia. En este contexto, la presente tesis exploró microorganismos del suelo, del intestino de insectos y asociados a plantas, así como metabolitos de plantas, como fuentes de nuevos antimicrobianos. Se evaluó su efecto frente a patógenos clínicamente relevantes (incluyendo bacterias del grupo ESKAPE y levaduras del género Candida) y fitopatógenos de importancia agrícola, tanto en estado planctónico como en forma de biofilms. Los resultados obtenidos revelaron una destacada actividad frente a distintos microorganismos, reforzando el potencial de los metabolitos naturales, particularmente actuando en conjunto, como base para el desarrollo de nuevas estrategias antimicrobianas. El manuscrito de esta tesis contiene 4 capítulos. El primer capítulo brinda una introducción general al tema y los objetivos. El segundo aborda la obtención de extractos a partir de cultivos microbianos y el relevamiento de la actividad antimicrobiana y antibiofilm. El capítulo tercero se centra en los estudios de compuestos antimicrobianos y antibiofilm a partir de plantas nativas, incluyendo el estudio de algunos mecanismos de acción y el estudio fitoquímico de los metabolitos responsables, así como su relación con la actividad antibiofilm. En el capítulo cuarto se desarrolla la discusión general de los resultados obtenidos en la tesis, sus conclusiones y perspectivas.

2025-01-01T00:00:00Z Quiroga Lozano, Cristina https://hdl.handle.net/20.500.12008/54076 2026-03-24T20:03:20Z 2025-01-01T00:00:00Z

Título: Diseño, evaluación y caracterización de nuevos derivados de benzisotiazolonas como agentes tripanosomátidos multi-blanco Autor: Quiroga Lozano, Cristina Resumen: En la última década y según la OMS, las enfermedades tropicales desatendidas (ETD) continúan siendo uno de los mayores retos de la salud pública global, afectando a más de mil millones de personas en regiones de bajos recursos. Entre ellas, la tripanosomiasis americana (enfermedad de Chagas), la tripanosomiasis africana humana ("enfermedad del sueño”) y la leishmaniasis destacan por su impacto sanitario y socioeconómico. A pesar de los esfuerzos internacionales, solo un nuevo fármaco fue aprobado para el tratamiento de la "enfermedad del sueño”, el fexinidazol, mientras que la enfermedad de Chagas aún se trata con fármacos desarrollados más de 50 años atrás, el nifurtimox (NFX) y el benznidazol (BNZ). Estos últimos presentan eficacia limitada en la fase crónica de la enfermedad y una marcada toxicidad, lo que denota la necesidad de descubrir y desarrollar nuevas entidades químicas superadoras. La presente tesis se centró en el diseño racional, síntesis, caracterización y evaluación de una nueva familia de 23 derivados de benzisotiazolonas con actividad antitripanosomátidos multidiana. Se seleccionó este andamio estructural tomando en cuenta que compuestos análogos (como el Ebsulfur: EbS, y el derivado con selenio Ebselen: EbSe) mostraron poseer actividad tripanocida e inhibitoria de las enzimas encargadas de la síntesis (tripanotión sintetasa: TryS) y reducción (tripanotión reductasa: TR) del principal tiol de bajo peso molecular de estos organismos, el tripanotión. Los compuestos sintetizados fueron caracterizados mediante RMN (1H y 13C) y espectrometría de masas. A partir del análisis quimioinformático, los compuestos se agruparon en cinco series para correlacionar las variaciones químicas con sus bioactividades. La evaluación biológica frente a Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi y Leishmania infantum permitió identificar varios compuestos con actividades destacadas, aunque especie-específicas. La mayoría de ellos ejerció una citotoxicidad potente y selectiva contra T. b. brucei (ej. derivado 14: CE50 = 0,0ββ 􀈝ε, IS = 677β, el 11μ 0,0λ1 􀈝ε, IS = 46β y el 1γμ 0,β1 􀈝ε; IS > λ5β), la cual fue similar o superior a la del EbS. Para T. cruzi, el compuesto 16 (CE50 = 2,1γ 􀈝ε; IS > λ4) resultó ser el más activo y comparable a BNZ, mientras otros derivados presentaron actividad micromolar baja con índices de selectividad superiores a 10. Notablemente, la mayoría de los compuestos careció de actividad contra 6 L. infantum, confirmando la especificidad de los nuevos derivados por blancos moleculares presentes en tripanosomas. Para indagar sobre el modo de acción de los compuestos más activos y teniendo en cuenta evidencias previas sobre la actividad pro-oxidante del EbS y el EbSe, los compuestos activos fueron ensayados contra una línea celular de T. b. brucei reportera del estado redox del metabolismo dependiente de tioles. Se verificó que la gran mayoría de los compuestos inducen la oxidación intracelular del pool de tioles de bajo peso molecular, afectando así la homeostasis redox. En base a estos resultados y para verificar nuestra hipótesis de diseño racional de derivados del EbS como inhibidores de TryS y TR, se estudió la inhibición de estas enzimas exclusivas de tripanosomátidos para los compuestos con mayor actividad bioselectiva. A diferencia del EbS y el EbSe, solo dos o cinco de los nuevos derivados logró inhibir más del 50% la actividad de la TryS y TR a concentraciones inferiores a 70 􀈝ε, respectivamente. En el marco de esta tesis se empleó el análisis de anclaje y dinámicas moleculares para comprender cómo la unión covalente de EbS y EbSe a la Cys270 de TryS afecta la actividad enzimática. En estudios previos de análisis de espectrometría de masas, este residuo había sido identificado estar modificado covalentemente por estos compuestos. Los resultados sugieren que la unión del compuesto a esta cisteína está favorecida por el entorno hidrofóbico y que el anclaje del compuesto a esta región altera la conformación del sitio activo de la enzima (principalmente la región de unión a ATP). Para uno de los inhibidores de TR (compuesto 7), verificamos experimentalmente que éste se une de manera covalente a la Cys221 (parcialmente expuesta al solvente) y que dicha unión afecta el correcto anclaje del NADPH al sitio activo de la enzima, lo cual explica el mecanismo de inhibición parcialmente irreversible observado mediante estudios cinéticos. En base a reportes previos que indican que el EbSe afecta el metabolismo de la glucosa por inhibir a la enzima Hexoquinasa (HK-1), se estudió si los derivados más activos y selectivos ejercen un efecto similar en la forma infectiva de T. b. brucei, la cual posee un metabolismo energético dependiente del glicólisis. A diferencia del EbSe, la mayoría de los derivados no afectaron la tasa de consumo de glucosa o tres de ellos (incluyendo al EbS) lo hicieron de manera marginal (10%). Esto sugiere que HK-1 no es el principal blanco molecular de los nuevos compuestos. 7 Con el fin de orientar futuras optimizaciones, se desarrolló un modelo QSAR tridimensional (CoMFA) que correlacionó propiedades estéricas y electrostáticas con la actividad frente a T. b. brucei. Este análisis indicó que sustituyentes voluminosos y grupos halogenados o metoxilo correlacionan positivamente con actividad. La eficacia terapéutica del compuesto 14 fue evaluada en un modelo murino agudo de infección por T. b. brucei, observándose una reducción parcial de la carga parasitaria y una extensión significativa de la supervivencia de los animales infectados sin signos de toxicidad. Este hallazgo validó a este compuesto como candidato a ser optimizado. Metodológicamente, en el marco de esta tesis se desarrollaron ensayos y modelos (ej. viabilidad celular y estado redox basados en proteínas reporteras luminiscentes y fluorescentes) innovadoras que ofrecieron un marco experimental robusto y fisiológicamente relevante para el estudio de compuestos en las formas clínicas de estos patógenos. También se participó en el desarrollo de un modelo de infección de organoides murinos (colon) por T. cruzi. Los resultados de esta investigación constituyen la primera caracterización sistemática de benzisotiazolonas frente a tripanosomátidos. Las contribuciones originales incluyen: (i) la expansión del andamiaje de EbS hacia derivados con perfiles de potencia y selectividad superiores a NFX y BNZ, (ii) la identificación de relaciones estructura-actividad especie-específicas que permiten aplicar nuevas estrategias de diseño selectivo, y (iii) la implementación de plataformas metodológicas aplicables al descubrimiento de fármacos. Estos hallazgos posicionan a las benzisotiazolonas en la etapa hit-to-lead, con bases sólidas para estudiar y optimizar su farmacocinética, así como avanzar en su desarrollo preclínico. Por tanto, este estudio constituye una contribución original al campo de la química medicinal aplicada a enfermedades tropicales desatendidas.

2025-01-01T00:00:00Z