Título:
Metionina sulfóxido reductasa A de Mycobacterium tuberculosis : desentrañando los secretos de su ciclo catalítico
Otros títulos:
Coordinador:
Director:
Compilador:
Autor:
Sastre Barrios, Santiago
Tutor:
Zeida Camacho, Ari Fernando
Radi, Rafael
Radi, Rafael
Tipo de documento:
Tesis de maestría
Editor:
Palabras clave:
Descriptores:
MECANISMO CATALITICO
QM/MM
ENERGIA LIBRE
UMBRELLA SAMPLING
QM/MM
ENERGIA LIBRE
UMBRELLA SAMPLING
Año de publicación:
2022
Contenido:
Resumen:
Mycobacterium tuberculosis (Mt) es el patógeno responsable de la enfermedad tuberculosis.
Como parte de la respuesta antimicrobiana, los macrófagos que son uno de los blancos
celulares más importantes de la micobacteria, generan especies reactivas del oxígeno y del
nitrógeno causando daño nitro-oxidativo en las biomoléculas de Mt. El parásito, por otro
lado, como respuesta a este estrés oxidativo presenta una amplia batería de respuestas
antioxidantes que regeneran este daño, entre las que se encuentra la metionina sulfóxido
reductasa A, que cataliza la reducción del isómero S de metionina sulfóxido presente en
proteínas.
El ciclo catalítico de ésta enzima consta de tres pasos, comenzando con la reducción de
Met-S-SO, llevada a cabo por un cisteína reactiva que se oxida a ácido sulfénico, liberando la
metionina reducida. El segundo y tercer paso constan de la formación de disulfuro
intramolecular entre el ácido sulfénico y la cisteína resolutiva, seguida de su reducción a
través de la tiorredoxina sistema.
En esta Tesis de Maestría se emplearon varios enfoques computacionales y experimentales
tales como ensayos de cinética rápida y en estado estacionario, dinámica molecular plana y
acelerada, cálculos de estructura electrónica, determinación de perfiles de energía libre,
docking proteína-proteína y análisis bioinformático de secuencias para caracterizar de forma
pormenorizada el mecanismo enzimáticos.
En primer lugar, se obtuvo un protocolo experimental para obtener una fracción pura de
MtmsrA recombinante, caracterizando completamente la cinética en estado estacionario y
pre-estacionario. A su vez, se caracterizaron las propiedades dinámicas de la MtmsrA en
diferentes estados de oxidación/ionización y de unión a diferentes ligandos, obteniendo
resultados coherentes con la evidencia experimental. Por otra parte, a partir de los cálculos de
estructura electrónica y los perfiles de energía libre determinados, los resultados presentes en
esta Tesis de Maestría sugieren que la formación del ácido sulfénico pasa por un único
intermediario sulfonio, a diferencia de lo reportado previamente en la literatura, y que
depende de catálisis ácido-base por un residuo Histidina conservado en la subclase de msrA a
la cual pertenece MtmsrA. En suma, este trabajo representa una caracterización detallada de
una importante enzima antioxidante de Mt.
Descripción:
Editorial:
Udelar. FQ
EN:
Financiadores:
Citación:
Sastre Barrios, S. Metionina sulfóxido reductasa A de Mycobacterium tuberculosis : desentrañando los secretos de su ciclo catalítico [en línea] Tesis de maestría. Montevideo : Udelar. FQ, 2022
Citación:
metadata.cc.license.name:
Documento del Gobiberno:
URI:
https://hdl.handle.net/20.500.12008/34032
ISBN:
e-ISBN:
ISSN:
ISMN:
Otros identificadores:
Título Obtenido:
Magíster en Química
Facultad o Servicio que otorga el Título:
Universidad de la República (Uruguay). Facultad de Química
Licencia:
Licencia Creative Commons Atribución - No Comercial - Sin Derivadas (CC - By-NC-ND 4.0)
Cobertura geográfica:
Cobertura temporal:
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Clasificación:
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Colecciones:
| Ficheros | Descripción | Tamaño | Formato | ||
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| TM_Sastre.pdf | Tesis de maestría | 18.98 MB | Adobe PDF |