Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem: https://hdl.handle.net/20.500.12008/50761

Título:

Estrategias para la obtención de cepas mutantes de micobacterias aplicadas a generar mutantes para el gen de la fosfatasa PtpA, reconocido factor de virulencia de Mycobacterium tuberculosis

Otros títulos:

Coordinador:

Director:

Compilador:

Autor:

Hergatacorzian, Valentina
Betancour Curutchet, Gabriela
Forrellad, Marina
Irving, Vivian
Silva-Álvarez, Valeria
Ferreira, Ana María
Margenat, Mariana
Gago, Gabriela
Bigi, Fabiana
Villarino, Andrea

Tutor:

Tipo de documento:

Póster

Editor:

Palabras clave:

Descriptores:

FOSFATASA
MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
GENES

Año de publicación:

2023

Contenido:

Resumen:

Estrategia habitual para la generación de mutantes: Recombinación Homóloga Primera etapa: se genera una cepa que expresa recombinasas mediante electroporación de la cepa bacteriana con un plásmido que contenga las secuencias de éstas y resistencia a un antibiótico. Segunda etapa: se realiza una segunda electroporación con la finalidad de introducir el fragmento a recombinar, tratándose generalmente de fragmentos up y down stream del gen de interés a mutar y un cassette que confiere resistencia a otro antibiótico, lo que permite la selección posterior del mutante deseado. De esta forma se modifica el gen objetivo e inhibe su transcripción. ➢ Nueva estrategia para la generación de mutantes: CRISPR/Cas9 Única etapa: electroporación de la cepa bacteriana con dos plásmidos, uno con la información para la expresión del sistema Cas9-sgRNA y el otro plásmido que codifica una integrasa L5 de expresión constitutiva. Una de las ventajas principales de utilizar la estrategia CRISPR/Cas9 interferente es la posibilidad de modular simultáneamente la expresión de más de un gen insertando al genoma bacteriano un único plásmido que contenga la secuencia de dCas9 y diferentes sgRNAs (McCarty et al., 2020, doi: 10.1038/s41467-020-15053-x). Por otra parte, en CRISPR/Cas9i es necesario inducir al sistema de silenciamiento, por lo que se puede tener un fenotipo normal o mutado a voluntad propia. Pero también es posible quitar el plásmido CRISPR incorporado en el genoma de forma sencilla (Meijers et al., 2020, doi: 10.1016/j.tube.2020.101983).

Descripción:

metadata.articulos.dc.description.uri:

Editorial:

Sociedad de Bioquímica y Biología Molecular

EN:

XIII Jornadas de la Sociedad de Bioquímica y Biología Molecular, Montevideo, 5-6 de octubre de 2023.

Financiadores:

FCE_1_2021_1_166706

Citación:

Hergatacorzian, V, Betancour Curutchet, G, Forrellad, M, [y otros autores]. Estrategias para la obtención de cepas mutantes de micobacterias aplicadas a generar mutantes para el gen de la fosfatasa PtpA, reconocido factor de virulencia de Mycobacterium tuberculosis [en línea] EN: XIII Jornadas de la Sociedad de Bioquímica y Biología Molecular, 5-6 de octubre de 2023. Montevideo : Sociedad de Bioquímica y Biología Molecular, 2023. 1 h

Citación:

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ISBN:

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ISMN:

Otros identificadores:

Cobertura geográfica:

Cobertura temporal:

Departamento académico:

Grupo de investigación:

Licencia:

Licencia Creative Commons Atribución - No Comercial - Sin Derivadas (CC - By-NC-ND 4.0)

Colecciones:

Publicaciones académicas y científicas
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